Niezwykle potężnym narzędziem do charakteryzacji makromolekuł jest różnicowa kalorymetria skaningowa. DSC umożliwia bezpośredni pomiar entalpii oraz temperatury przemiany fazowej (Tm), a przez to pozwala określić stabilność termiczną makromolekuł.
Kalorymetria DSC wykorzystywana jest w badaniach nad nowymi lekami. Technika umożliwia:
- wybór najbardziej stabilnych białek lub makromolekuł,
- optymalizację warunków produkcyjnych,
- określenie optymalnych warunków dla formulacji ciekłych,
- badanie interakcji z ligandami.
Do badań nad stabilnością i oddziaływaniami makromolekuł wykorzystywana jest również izotermiczna kalorymetria miareczkowa. ITC mierzy ciepło uwalniane lub absorbowane w trakcie powstawania wiązania, a przez to pozwala zrozumieć reakcje zachodzące pomiędzy molekułami.
Kalorymetria ITC wykorzystywana jest w badaniach nad nowymi lekami. Technika umożliwia:
- określenie powinowactwa reagentów,
- wybór potencjalnych związków leczniczych,
- pomiar termodynamiki reakcji,
- określenie mechanizmu wiązania,
- badania nad kinetyką enzymatyczną.
Inną techniką pomiarową służącą do pomiaru interakcji, w nieco inny sposób, jest pomiar rezonansu plazmonowego powierzchniowego – SPR pozwala na wyznaczenie parametrów wiązania i spojrzenie na reakcję od kinetycznej strony.
Analizatory SPR są złotym standardem w przemyśle farmaceutycznym ponieważ w bardzo szybki sposób pozwalają na:
- określenie powinowactwa między reagentami,
- analizę przyłączania i odłączania analitu od liganda (kon, koff),
- wyznaczenie ogólnej kinetyki reakcji,
- szybkie porównanie wiązań różnych cząsteczek z jednym celem (w przypadku wyposażenia urządzenia w sampler
Mierzone parametry: | Mikrokalorymetria, analiza bez konieczności znakowania |
Zakres temperatur: | -10°C - 130°C |
Wydajność: | Od 2 do 50 na 24h |
Technika: | Skaningowa kalorymetria różnicowa (DSC), Izotermiczna kalorymetria miareczkowa (ITC) |
Mierzone parametry: | stała wiązania KD, kon, koff |
Zakres temperatur: | 15 – 35 °C |
Objętość próbki: | 2 µl |
Technika: | Powierzchniowy rezonans plazmonowy (SPR) |
Mierzone parametry: | stała wiązania KD, kon, koff |
Zakres temperatur: | 4 - 40°C |
Objętość nastrzyku: | 5 – 150 μl |
Technika: | Powierzchniowy rezonans plazmonowy (SPR) |
Mierzone parametry: | Analiza strukturalna: struktura drugo- i trzeciorzędowa Stabilność: termiczna i chemiczna |
Zakres temperatur: | 20 - 90°C |
Zakres pomiarowy: | 163 – 1150nm (możliwość rozszerzenia do 1700nm) |
Wydajność: | Skan spektrum dalekiego UV – 1:40 min |
Mierzone parametry: | Pomiar stabilności strukturalnej białek |
Technika: | Pomiar fluorescencji wewnętrznej po denaturacji chemicznej |
Wydajność: | Płytka 96 dołkowa – 50 sekund Płytka 384 dołkowa – 2,5 minuty |